基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室又稱PCR實(shí)驗(yàn)室,是以臨床診斷治療為目的,以擴(kuò)增檢測DNA或RNA為方法的檢測技術(shù)。如聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)、連接酶鏈反應(yīng)(LCR)、轉(zhuǎn)錄依賴的放大系統(tǒng)(TAS)自主序列復(fù)制系統(tǒng)(3SR)和鏈替代擴(kuò)增 (SDA)等。PCR實(shí)驗(yàn)室分為4各區(qū)即試劑準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)和產(chǎn)物分析區(qū)。
PCR實(shí)驗(yàn)室建設(shè)布局:
工作區(qū)域應(yīng)設(shè)置緩沖間,工作間和緩沖間之間要配備連鎖裝置,實(shí)驗(yàn)室之間不能直通,不同的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有獨(dú)立的空間環(huán)境。
各區(qū)之前如果是緊密相連,需要安裝物品傳遞窗。
每個(gè)工作區(qū)域的頂部應(yīng)安裝紫外燈。紫外燈的波長為254nm,安裝數(shù)量為每20m?an安裝一支40w打的紫外線。
實(shí)驗(yàn)室較為理想的布局模式為有一個(gè)專用走廊,試劑準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)和產(chǎn)物分析區(qū)很規(guī)范的排列在一起,前三個(gè)區(qū)各有一個(gè)緩沖間,可供換工作服和工作鞋使用,頂上可裝一紫外線。內(nèi)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)設(shè)為正壓狀態(tài), 緩沖間為負(fù)壓狀態(tài),每一區(qū)域都須有明確的標(biāo)記,工作按試劑準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)至產(chǎn)物分析區(qū)單一流向進(jìn)行,各區(qū)的儀器設(shè)備包括工作服、鞋、實(shí)驗(yàn)室記錄本和筆等都必須專用。
如果無法做到以上模式,以下基本要求必須做到:
1、四個(gè)區(qū)域必須是相互獨(dú)立的。
2、各區(qū)的儀器設(shè)備及各種物品必須專用的。
3、各區(qū)完全獨(dú)立,緩沖間可有可無,如果一個(gè)區(qū)套一個(gè)區(qū)的模式,區(qū)間不能直通,應(yīng)有緩沖間,拱換工作服及鞋子用,并保證兩個(gè)區(qū)間始終處于完全的分隔狀態(tài)。
4、產(chǎn)物分析區(qū)應(yīng)安裝排風(fēng)扇或其他抽風(fēng)裝置,維持負(fù)壓。
5、PCR實(shí)驗(yàn)室通風(fēng)系統(tǒng)及壓力控制。
6、各區(qū)域之間應(yīng)具備單向的實(shí)驗(yàn)工藝流、氣流、物流,形成單向流程的保護(hù)屏障,避免實(shí)驗(yàn)之間的相互干擾,防止氣溶膠擴(kuò)散對實(shí)驗(yàn)過程造成污染。
PCR實(shí)驗(yàn)室并沒有嚴(yán)格的凈化要求,為了能夠避免交叉污染應(yīng)采用全送全排的氣流組織形式,嚴(yán)格控制送、排風(fēng)的比例以保證各實(shí)驗(yàn)區(qū)的壓力要求。